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液相色譜儀分析食品添加劑
更新時間:2016-01-13   點擊次數(shù):3822次

食品添加劑是為改善食品色、香、味等品質(zhì),以及為防腐和加工工藝的需要而加入食品中的化合物質(zhì)或者天然物質(zhì)。目前我國食品添加劑有23個類別,2000多個品種,包括酸度調(diào)節(jié)劑、抗結(jié)劑、消泡劑、抗氧化劑、漂白劑、膨松劑、著色劑、護(hù)色劑、酶制劑、增味劑、營養(yǎng)強化劑、防腐劑、甜味劑、增稠劑、香料等。

食品添加劑的安全使用是非常重要的。理想的食品添加劑是有益無害的物質(zhì)食品添加劑,特別是化學(xué)合成的食品添加劑大都有一定的毒性,所以使用時要嚴(yán)格控制使用量。不論食品添加劑的毒性強弱、劑量大小,對人體均有一個劑量與效應(yīng)關(guān)系的問題,即物質(zhì)只有達(dá)到一定濃度或劑量水平,才顯現(xiàn)毒害作用。

 

液相色譜儀主要分析食品中的下列組分:各種營養(yǎng)成分分析,食品添加劑、有毒有害物質(zhì)、香精香料分析、添加劑分析、脂肪酸 甲酯分析、食品包裝材料分析、 農(nóng)藥及獸藥殘留。

下面用液相色譜儀來分析視屏添加劑:

1.對儀器的一般要求

所用的儀器為waters液相色譜儀。 色譜柱的填料和流動相的組分應(yīng)按各品種項下的規(guī)定。常用的色譜柱填料有硅膠和化學(xué)鍵合硅膠。后者以十八烷基硅烷鍵合硅膠zui為 常用,辛基鍵合硅膠次之,氰 基或氨基鍵合硅膠也有使用;離子交換填料,用于離子交換色譜;凝膠或玻璃微球等,用于分子排阻色譜等。注樣量一般為數(shù)微升。除 另有規(guī)定外,柱溫為室溫, 檢測器為紫外吸收檢測器。在用紫外吸收檢測器時,所用流動相應(yīng)符合紫外分光光度法。

正文中各品種項下規(guī)定的條件除固定相種類、流動相組分、檢測器類型不得任意改變外,其余如色譜柱內(nèi)徑、長度、固定相牌號、載體粒度、流動相流速、混合流動 相各組分的比例、柱溫、進(jìn)樣量、檢測器的靈敏度等,均可適當(dāng)改變,以適應(yīng)具體品種并達(dá)到系統(tǒng)適用性試驗的要求。

2.系統(tǒng)適用性試驗

按各品種項下要求對儀器進(jìn)行適用性試驗,即用規(guī)定的對照品對儀器進(jìn)行試驗和調(diào)整,應(yīng)達(dá)到規(guī)定的要求;或規(guī)定分析狀態(tài)下色譜柱的zui小理論板數(shù)、分離度和拖尾因子。

(1)色譜柱的理論板數(shù)(n)在選定的條件下,注入供試品溶液或各品種 項下規(guī)定的內(nèi)標(biāo)物質(zhì)溶液,記錄色譜圖,量出供試品主成分或內(nèi)標(biāo)物質(zhì)峰的保留時間t(以分鐘或長度計,下同,但應(yīng)取 相同單位)和半高峰寬(W ),按n=5.54(t/W)計算色譜柱的理論板數(shù),如果測得理論板數(shù)低于各品種項下規(guī)定的zui小理論板數(shù),應(yīng)改變色譜柱的某些條件(如柱長、載體性能、色 譜柱 充填的優(yōu)劣等),使理論板數(shù)達(dá)到要求。

(2)分離度定量分析時,為便于準(zhǔn)確測量,要求定量峰與其他峰或內(nèi)標(biāo)峰 之間有較好的分離度。分離度(R)的計算公式為: 2(t-t) R=──W+W 式中t為相鄰兩峰中后一峰的保留時間;t為相鄰兩峰中前一峰的保留時 間;W及W為此相鄰兩峰的峰寬。除另外有規(guī)定外,分離度應(yīng)大于1.5。

(3) 拖尾因子 為保證測量精度,特別當(dāng)采用峰高法測量時,應(yīng)檢查待測峰 的拖尾因子(T)是否符合各品種項下的規(guī)定,或不同濃度進(jìn)樣的校正因子誤差是否符合要求。拖尾因子 計算公式為:W T=────── 2d 式中W為 0.05峰高處的峰寬;d為峰極大至峰前沿之間的距離。 除另有規(guī)定外,T應(yīng)在0.95~1.05間。 也可按各品種校正因子測定項下,配制相當(dāng)于 80%、100%和120%的對照品溶液,加入規(guī)定量的內(nèi)標(biāo)溶液,配成三種不同濃度的溶液,分別注樣3次,計算 平均校正因子,其相對標(biāo)準(zhǔn)偏差應(yīng)不大于 2.0%。

3.測定法

定量測定時,可根據(jù)樣品的具體情況采用峰面積法或峰高法。但用歸一法或內(nèi)標(biāo)法測定雜質(zhì)總量時,須采用峰面積法。

(1)面積歸一化法測定供試品(或經(jīng)衍生化處理的供試品)中各雜質(zhì)及雜質(zhì) 的總量限度采用不加校正因子的峰面積歸一法。計算各雜質(zhì)峰面積及其總和,并求出占總峰面 積的百分率。但溶劑峰不計算在內(nèi)。色譜圖的記錄時間應(yīng)根據(jù)各品種 所含雜質(zhì)的保留時間決定,除另有規(guī)定外,可為該品種項下主成分保留時間的倍數(shù)。

(2)主成分自身對照法當(dāng)雜質(zhì)峰面積與成分峰面積相差懸殊時,采用主成分 自身對照法。在測定前,先按各品種項下規(guī)定的雜質(zhì)限度,將供試品稀釋成一定濃度的溶液作 為對照溶液,進(jìn)樣,調(diào)節(jié)檢測器的靈敏度或進(jìn)樣量,使對照溶液中的 主成分色譜峰面積滿足準(zhǔn)確測量要求。然后取供試品溶液,進(jìn)樣,記錄時間,除另有規(guī)定外,應(yīng) 為主成分保留時間的倍數(shù)。根據(jù)測得的供試品溶液的各雜質(zhì)峰面積 及其總和并和對照溶液主成分的峰面積比較,計算雜質(zhì)限度。

(3)內(nèi)標(biāo)法測定供試品中雜質(zhì)的總量限度 采用不加校正因子的峰面積法。 取供試品,按各品種項下規(guī)定的方法配制不含內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的供試品溶液,注入儀器,再配制含有內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的供試品溶液,在同樣的條件下注樣。記錄的時間除另有規(guī) 定外,應(yīng)為該品種項下規(guī)定的內(nèi)標(biāo)峰保留時間的倍數(shù),色譜圖上內(nèi)標(biāo)峰高應(yīng)為記錄儀滿標(biāo)度的30%以上,否則應(yīng)調(diào)整注樣量或檢測器靈敏度。

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