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紫外分光光度計檢測血中碳氧血紅蛋白含量快速診斷一氧化碳中毒
更新時間:2016-09-05   點擊次數:4495次

摘要:目的 建立4300紫外可見分光光度計撿剝血中碳氧血紅蛋白含量方

法快速診斷一氧化碳(CO)中毒,方法檢血用0 1Na2CO3稀釋.加入連二亞硫酸鈉.4300紫外可見分光光度計測定500 nm600nm吸收光譜和538nm555nm處吸光度值,確定碳氧血紅蛋白,計算碳氧血紅蛋白含量。

結果 氧和血紅蛋白的zui大吸收波長為555 nm,碳氧血紅蛋白的zui大吸收波長為538 nm555 nm4300紫外可見分光光度計檢測血中碳氧血紅蛋白含量(10%~90)回收率平均為95%一l10%.標準差為2.1-8. 0%,zui低檢出農度為2%:

80例可疑CO中毒者中63例血中檢出碳氧血紅蛋白,平均含量為35%。

168倒可疑CO中毒死亡者中124例血中檢出碳氧血紅蛋白。

結論4300紫外可見分光光度計檢測血中碳氧血紅蛋白,具有快速、準確、操作簡便、結果可靠的特點,可應用于CO中毒的診斷和CO中毒死亡的法醫學鑒定。

關鍵詞:一氧化碳中毒;碳氧血紅蛋白;4300紫外可見分光光度計

 

1資料與方法

1.1藥品和試劑:連二亞硫酸鈉、肝索鈉均為國產分析純。

1.2主要儀器:4300紫外可見分光光度計,掃描渡長范圍(200--700)nm

1.3標本采集:可疑CO中毒病人,肘靜脈采血(510)mL,加入肝素化試管中,試管上部不留空問,密封,立即送檢。

1.4碳氧血紅蛋白定性定量檢驗:檢血40uL,加入1 0mL0 1Na2CO3溶液,4300紫外分光光度計測定(500--600)nm吸收光譜及538nm555nm處吸光度值(A555)。根據吸收光譜形狀和zui大吸收波長確定有無碳氧血紅蛋白,按公式COHb=A538÷A555÷0 458 -1.692計算血中碳氧血紅蛋白含量。

2結果

2.1 碳氧血紅蛋白光譜掃描圖

取新鮮肝素鈉抗凝人血100mL_通人CO飽和(2-3)h,充分飽和,使碳氧血紅蛋白含量達100%。配制不同碳氧血紅蛋白含量的系列血液樣品,按上述方法操作和扣描,得到不同碳氧血紅蛋白含量血液的光譜掃描。

2.2 血中碳氧血紅蛋白含量檢測回收率

用空白血和CO充分飽和血(碳氧血紅蛋白含量為100)配制不同碳氧血紅蛋白含量(10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90)的系列血液樣品,每個濃度血樣按前述方法取5份檢測氧血紅蛋白含量。詳見表1

 

2.3 中毒病人檢測

選擇200511-20051230日山西醫科大學*醫院急診科、山西醫科大學第二醫院急診科、山西省人民醫院急診科所送可疑CO中毒病人80例,其血中碳氧血紅蛋白含量檢測結果。共檢驗80例,槍出COHb63例,未榆出COHb17例,COHb含量35%,檢出含量25%~65%。

2 4 CO中毒死亡者檢測

200511-20051230日山西省范圍內部分可疑CO中毒死亡案例檢測結果。共檢驗168例,未檢出COHb44(26.2),檢出COHb124(73.8)COHb含量9.0-70.6%,其中<10%例(0.08)10%~206(4.80)20%~308(6.45)30%~40i(0.08)40%~509(7.25)(50%~60)51(41 1)61%~7035(28 20)>7013(10.50)

3討論

3.1血中碳氧血紅蛋白檢測

建立血中碳氧血紅蛋白的4300紫外可見分光光度計檢測方法,光譜掃描和吸光度值可同時進行,整個檢驗可在10 min內完成。與化學法和氯化鈀試驗法相比,具有操作簡便、耗時短、成本低等優點,檢測靈敏度、回收率均達到生物檢驗內毒物檢測的要求,可應用于CO中毒的診斷和CO中毒的法醫學鑒定。

3.2中毒病人檢測

臨床CO中毒癥狀和體征比較明顯,病史結臺臨床癥狀診斷準確度較高。本研究巾臨床診斷80例可疑cO中毒病人55例血中檢出COHb。但中毒程度的判定,尤其懷疑合并用藥或病史不清伴有昏迷時COHb定量檢測很有必要。所檢血中COHb含量zui高的昏迷病人血中COHb65%,10 mm內檢驗完畢,依照檢驗結果很快進釘高壓氧艙治療,24 h后病人意識恢復,各種生命體征恢復正常。

3.3 CO中毒死亡案例檢測

一般認為,CO中毒死亡者血中碳氧血紅蛋白含量多達60%~80%。2005年山西省部分CO中毒死亡案例死者血中COHb檢出情況顯示,26.2%中未檢出COHb73.8%檢出COHb。后者(124)COHb含量大于60%者占3872%,50%~60%者占4l.1%,40%~50%者占7.25%,小于40%者占12 9%,而在大于50%的99例血中均未檢出其他毒物,故認為血中碳氧血紅蛋白含量大于50%,排除其他毒物即可診斷為CO中毒死亡。

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